请登录 免费注册

快速发布采购手机版本站服务帮助中心咨询服务热线:0571-85363692

您现在的位置:首页 >技术文献 >技术交流 >寒冬,ELISA实验不可忽略的包被条件

寒冬,ELISA实验不可忽略的包被条件

提供者:上海劲马实验设备有限公司 发布时间:2018/11/20 阅读次数:30次 进入该公司展台

  初冬的早晨充满着活力。那习习的北风“倒吹”着树枝!恰似在迎接冬儿的到来吧!也许,我对冬天情有独钟!这习习的北风竟也变得温暖起来了!那么,ELISA试剂盒实验---如何选择更优化的包被条件?

一、包被抗原的选择 
  包被抗原可分为天然蛋白、重组蛋白和小分子抗原三大类。天然蛋白需经纯化才能用直接吸附法包被,对于含杂质较多的抗原可以采用间接捕获法包被(先用能够与目的抗原反应的物质如抗体直接吸附在酶标板上,再通过特异性反应使抗原固相化)。
  经纯化的重组蛋白一般皆可直接包板.小分子抗原比如多肽以及一些小分子有机化合物,由于分子量太小,往往难于直接吸附在酶标板上,一般都先使其与无关蛋白质如BSA等偶联,偶联物吸附于固相载体上。

二、包被液的选择 
  一般常用的是pH9.6的碳酸盐缓冲液,如果包被的抗原在碱性条件下不稳定的话,也可以使用pH7.2的磷酸盐缓冲液。

三、包被温度的选择 
  通常是4-8度条件下过夜或者37度保温2小时,我们强烈建议4-8度条件下包被,有利于蛋白活性的保持。

四、包被浓度的选择 
  包被的最适浓度随固相载体和包被物的性质变化,一般蛋白质的包被浓度为1-5ug/ml,要明确针对特定包被抗原的最适包被浓度需要通过实验来确定。

五、包被后需要封闭吗?应该选择什么样的封闭体系? 
  封闭是否必要,取决于ELISA的模式及具体的实验条件。一般说来,双抗体夹心法,只要酶标记物是高活性的,操作时洗涤彻底,不经封闭也可得到满意的结果。而在间接法测定中,封闭一般是必不可少的。
  常用的封闭剂有0.05%-0.5%的BSA、10%的小牛血清、1%明胶、5%的脱脂奶粉,AbMART推荐使用5%脱脂奶粉,价廉而且封闭能力强,不过5%脱脂奶粉只适合短期内使用,不宜长期保存,所以试剂盒中较少使用。

另外,上海劲马生物这些优势您得知道:
1.专业生产厂家并诚信代理多个国外著名品牌。
2.拥有原装进口抗体更高效、更灵敏、更特异。
3.包被操作更规范吸附均匀,吸附性好,空白值低,孔底透明度高,远超行业领先。
4.有先进的优化方案,重复性、可靠性惊呆所有小伙伴。
5.无论售前售后售中,都有专业、高效、规范的技术团队为您服务。

  上海劲马生物科技有限公司以诚信为本,努力打造优质的品牌,为您提供全方位的售中、售前、售后服务,具有优质的技术团队,把国际上优质的产品引入国内市场,满足国内广大客户的需求,在二十一世纪生命科学蓬勃发展的时代,将紧跟生命科学的发展动态,为广大科研学者探索生命的奥秘而奉献绵薄之力!

                                   

速写达人
版权说明

凡本网注明"来源:久久环保网"的所有作品,版权均属于久久环保网,未经本网授权不得转载、摘编或利用其它方式使用。已获本网授权的作品,应在授权范围内使用,并注明"来源:久久环保网"。违者本网将追究相关法律责任。

本网凡注明"来源:xxx(非本网)"的作品,均转载自其它媒体,转载目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点和对其真实性负责,且不承担此 类作品侵权行为的直接责任及连带责任。如其他媒体、网站或个人从本网下载使用 ,必须保留本网注明的"稿件来源",并自负版权等法律责任。

如涉及作品内容、版权等问题,请在作品发表之日起两周内与本网联系,否则视为放弃相关权利。

最新产品 - 最新资讯- 技术文章 - 公司动态- 最新求购 - 每日产品

浙公网安备 33010502000806号