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煤炭总医院订购ELISA试剂盒并咨询相关问题

发布时间:2015/10/12 来源:久久环保网  阅读次数:1395 >>进入该公司展台

煤炭总医院刘老师在我司订购了小鼠抑制素B(INH-B)elisa试剂盒小鼠肌球蛋白(Myosin)ELISA试剂盒,订购后同时向我司钱经理咨询ELISA试剂盒的一些问题,ELISA试剂盒主要的问题有哪些呢?
      在ELISA试剂盒实验中,加底物后多长时间终止反应测定结果呢?让我司钱经理为您讲解,一般可采取以下这两种方法:
第一、任意确定一个时间,如20分钟或30分钟终止反应,测定被检标本和阳性参考标本的O.D值。
第二、制备好一批酶结合物后预试时间,在反应温度固定时,当阳性参考血清O.D值达到1.0时终止反应,记录这个时间,如30分钟,以后用本批酶结合物测定待检样品时都采用同一时间终止反应,这个办法不需要校正,比较方便。
国外在使用自动测定仪时,加底物后随时测定,每块试验板上阳性参考血清的O.D值,当其达到1.0时,立即将全板上被试标本终止反应进行测定,这样所得结果比较一致。我国也有自动酶标测定仪,但由于固相载体不够均匀,也很难用板来直接测定。
在ELISA中所加酶结合物之浓度,加后孵育时间以及加底物后孵育时间。这三个因素也是互相有影响的。一般讲,酶结合物浓度低,则要求孵育时间长些,而酶结合物浓度高则要求孵育时间短些,可根据实验的具体情况,变更不同因素,以取得良好的结果。
由于ELISA中变异因素多,对于要诊断某一疾病时,必须进行一系列实验室预试,摸索,或叫实验研究,在酶结合物已经确定的情况下,一般要求预测以下5个条件:
1.抗原包被浓度;
2.被检血清稀释度,即测剂量反应曲线;
3.第一抗体作用时间;
4.酶结合物作用时间;
5.底物作用时间。
一旦试验条件摸清,以后在正式测定时,必须固定条件,不要随时改变,以使试验系统保持足够的稳定性。

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